项目查询系统 用户名: 密码: 登录 注册

当前位置:首页 >> 技术服务 >> 慢病毒服务专区

shRNA慢病毒细胞株构建

来源:admin  浏览量:  更新时间:2016-10-20 09:08:17

siRNA和shRNA载体

在目前的研究中,实验基因表达水平的敲低主要是通过转染siRNA或者shRNA载体来实现的。

siRNA(Small interfering RNA)是一种21-25核苷酸的小分子RNA,由Dicer(RNAaseⅢ家族中对双链RNA具有特异性的酶)加工而成。SiRNA是siRISC的主要成员,激发与之互补的目标mRNA的沉默。由于有些类型细胞脂质体效果差,转移到细胞内的siRNA半衰期短,体外合成siRNA对基因表达的抑制作用通常是短暂的,因而使其应用受到较大的限制。

shRNA载体可以将siRNA把位点克隆到载体上,然后转移到细胞内转录形成siRNA,其对基因表达抑制的效果也不逊色于体外合成siRNA,在长期稳定表达载体的细胞中,甚至可以发挥长期阻断基因表达的作用


shRNA慢病毒包装

binance info官网实验室提供带PURO筛选标记和GFP/PURO双筛选标记的shRNA载体,将目标靶点克隆到shRNA载体,然后通过转染获得慢病毒毒液。


shRNA慢病毒感染及稳转株筛选

使用慢病毒毒液感染目标细胞,然后通过筛选标记进行筛选,挑取单克隆恢复培养成细胞系(贴壁细胞),最终获得稳转细胞系

 

服务价格



客户提供:

1、目标基因的基因号及shRNA靶点序列;

2、如客户不能提供明确的靶点序列,本实验室可免费设计3条靶点进行验证;靶点敲低效率验证试验需另行收费。


实验结果:

1、包装的毒液或稳转细胞株;

2、操作手册一份;

3、引物序列、载体图谱、测序报告;

4、详细的项目报告。

上一篇:没有了

电话:027-87003398

客服QQ:1968663631

Email:service@bioeagle.com

ICP备案号鄂ICP备14014009号-1

在线咨询
在线咨询 ×关闭
在线咨询