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minigene技术服务(mRNA异常剪接体外验证)

来源:admin  浏览量:  更新时间:2021-05-19 16:47:22

细胞水平验证突变对mRNA剪接的影响

您手中是否存有患者的基因突变但无法进行致病性评级,使您的诊断或研究暂停?

您是否考虑过该突变会影响基因mRNA的正常剪接,进而影响基因的功能?

您是否正在为无法或难于再次采集患者的样品进行RNA转录分析而苦恼?

您是否正在为突变基因在血液中无表达或表达过低而烦恼?

只需要患者基因突变信息minigene技术就能帮您解决上述问题!


l 服务概述

mRNA前体的正确剪接是真核生物基因表达的关键步骤,其剪接异常将会影响基因表达量或功能的异常。minigene技术又称为mRNA异常剪接体外验证实验,是一项针对突变位点是否影响mRNA剪接的细胞水平验证实验。通过克隆带有变异位点(包括剪切位点附近以及深度内含子中的点突变、插入及缺失等变异类型)的目标基因组片段,构建重组表达载体,转染细胞株后进行RNA抽提及cDNA反转,再利用电泳和测序技术验证该突变对mRNA剪接的影响(外显子缺失、内含子滞留)。


l 服务特点

(1)根据突变所在位置,结合生物信息学的方法,帮助客户预测得到阳性结果(即突变会影响剪切)的可能性,并设计整套优化实验方案;

(2)根据客户需求、疾病特点等因素,选取两种(或以上)不同的真核表达载体以及两种(或以上)不同组织来源的细胞系进行mRNA剪接验证,提高获得阳性结果的可能。


 

l 服务内容




l 客户提供

客户需提供突变检测报告及纯度质量合格的突变位点携带者(纯和、杂合均可)及正常人的基因组DNA,低温寄送。


 

l 交付结果

(1)构建的载体

(2)服务报告:内容包括生物信息学预测结果、minigene构建策略示意图、重组载体酶切及测序结果、minigene剪接结果电泳图及测序结果等。


 

l 联系我们

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