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双荧光素酶报告检测(miRNA靶基因验证)

来源:admin  浏览量:  更新时间:2018-07-24 15:05:29

  • 项目概述

microRNA(小分子核糖核酸,miRNA/miR)是一类在真核生物中广泛存在、高度保守,且具有调控功能的非蛋白编码的小RNA,长度约19-25个核苷酸,其通过与目标mRNA的 3'-UTR 互补结合,进而抑制转录后的蛋白表达。miRNA在细胞的增殖、分化、凋亡、迁移等生命过程中起重要调控作用。同时miRNAs的表达水平也是一种理想的疾病标志物,在疾病的起始和发生发展过程中扮演重要角色,可用于肿瘤和正常组织的鉴别,辅助病程分期等。

miRNA主要通过结合靶基因的3'UTR起作用,将目的基因3'UTR构建至荧光素酶报告基因(luc2)的后面,通过比较过表达或者干扰miRNA后,检测报告基因的改变(监测荧光素酶活性变化),即可定量反映miRNA对目的基因的抑制作用;结合基因定点突变等方法还可以进一步确定miRNA与靶基因3’UTR的作用位点。

币安公司的荧光素酶报告基因检测系统采用萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶组成双荧光素酶报告基因系统。萤火虫荧光素酶与基因表达的特定实验条件相关,海肾荧光素酶用来做转染的内参,以校正不同样品之间转染的转染效率。

  • 服务流程


  • 服务优势:

1.专业化实验方案设计

2.合理设计双阴性对照试验(乱序靶点和scramble miRNAs);

3.从载体到底物使用全套Promega系统

4.检测系统采用萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶组成双荧光素酶报告基因系统

5.专业化生物信息学分析结果数据

  • 服务内容及说明

服务项目

内容

备注

服务周期

 

microRNA质粒构建

序列分析

设计方案

ü 根据客户提供信息进行启动子序列或microRNA分析

ü 以客户要求的载体进行构建

 

5-10个工作日

基因调取

载体构建

测定序列

分析结果

 

双荧光素酶报告基因验证

细胞培养

 

 

ü 如无特殊要求,默认用293T转染

 

5-10个工作日

共转染细胞

荧光素酶反应发光检测

结果分析

 

  • 客户提供

1、不同长度及不同形式的miRNA及相应的DNA信息;

2实验设计和要求(含质粒载体和转染细胞)。


  • 交付结果

1、带目的基因的质粒/甘油菌;

2、客户要求的中间样品;

3、实验原始数据、图片、分析结果等;

4、全套完整的技术服务报告。


  • 服务价格

 详情请咨询本公司

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