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蛋白原核表达服务

来源:admin  浏览量:  更新时间:2016-10-26 16:29:42

蛋白原核表达服务内容:

服务内容

价格

周期

表达载体构建

800~1200

2~3周

表达菌株转化

200

1

小量诱导表达实验

1000

2~4周

重组蛋白的大量表达及优化

1500

2~4周

蛋白纯化及浓缩

1500

2~4周

重组蛋白的标签切除(可选)

 询价

2


实验内容详述:

(1)表达载体构建

如无需进行序列优化,请客户提供目标序列模板(质粒或菌液,不接受cDNA)及模板的测序报告,我们将序列片段直接克隆到客户选定的表达载体中。

如需要对序列进行优化,我们会根据客户提供的基因信息,对密码子进行分析及优化,通过在线网站预测蛋白质的理化性质,如等电点、稳定性等。  对于优化后序列,建议通过基因合成的方式获得DNA片段,然后再克隆到客户选定的表达载体。


(2)表达菌株转化

将构建正确的表达载体转化到BL21、rosetta等表达菌株中。


(3)小量诱导表达实验

小量诱导表达实验的目的,是通过调整载体、菌株以及培养条件优化重组蛋白在上清中的表达量。本公司推荐尝试2个菌株、2个诱导温度、7个IPTG浓度下,重组蛋白的表达量,以选择最佳的表达方案。

预实验结果以SDS-PAGE电泳图为准。





(4)重组蛋白的大量表达及纯化

此步将放大表达体系,增加大肠杆菌培养量,以获得更多的重组蛋白,并在纯化过程中尝试调整漂洗及洗脱条件,以得到高纯度的重组蛋白。

本公司可提供的纯化标签有His、GST、MBP、Intein标签,客户可根据后续实验要求进行选择。

同时可按照客户要求将重组蛋白溶液进行脱盐及浓缩处理。


(5)重组蛋白的标签切除(可选)

切除融合表达的标签蛋白,获得的重组蛋白将不带有任何标签。


咨询详情请联系

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